分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室常用儀器及使用方法
事實(shí)證明，在科學(xué)飛速發(fā)展的今天，無(wú)論從事哪個(gè)領(lǐng)域的研究，要想突破，除了有良好的理論基礎(chǔ)外，更重要的是依賴于先進(jìn)的技術(shù)和優(yōu)良的儀器設(shè)備以及良好的研究環(huán)境。一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室除了具有一般生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)儀器設(shè)備外，還具有一些特殊用途的儀器，這些儀器一般較精密，價(jià)格昂貴。下面介紹這些儀器的使用方法和注意事項(xiàng)。
一、冷凍離心機(jī)
低溫分離技術(shù)是分子生物學(xué)研究中必不可少的手段。基因片段的分離、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物樣品的分離制備實(shí)驗(yàn)中都離不開(kāi)低溫離心技術(shù)，因此低溫冷凍離心機(jī)成為分子生物學(xué)研究中必備的重要儀器。
在國(guó)內(nèi)，有多個(gè)廠家生產(chǎn)冷凍離心機(jī)，本實(shí)驗(yàn)室的高速冷凍離心機(jī)為GL-20G-Ⅱ型（上海安亭），落地式。配有角式轉(zhuǎn)頭：6×50ml、12×10ml和12×1.5ml。極限轉(zhuǎn)速20000rpm。
1. 安裝與調(diào)試
離心機(jī)應(yīng)放置在水平堅(jiān)固的地面上，應(yīng)至少距離10cm以上且具有良好的通風(fēng)環(huán)境中，周圍空氣應(yīng)呈中性，且無(wú)導(dǎo)電性灰塵、易燃?xì)怏w和腐蝕性氣體，環(huán)境溫度應(yīng)在0～30℃之間，相對(duì)濕度小于80%。試轉(zhuǎn)前應(yīng)先打開(kāi)蓋門，用手盤動(dòng)轉(zhuǎn)軸，輕巧靈活，無(wú)異常現(xiàn)象方可上所用的轉(zhuǎn)頭。
轉(zhuǎn)子準(zhǔn)確到位后打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)，然后用手按住門開(kāi)關(guān)，再按運(yùn)轉(zhuǎn)鍵，轉(zhuǎn)動(dòng)后立即停止，并觀察轉(zhuǎn)軸的轉(zhuǎn)向，若逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)即為正確，機(jī)器可投入使用。
2. 操作程序
（1）插上電源，待機(jī)指示燈亮；打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)，調(diào)速與定時(shí)系統(tǒng)的數(shù)碼管顯示的閃爍數(shù)字為機(jī)器工作轉(zhuǎn)速的出廠設(shè)定，溫控系統(tǒng)的數(shù)碼管顯示此時(shí)離心腔的溫度。
（2）設(shè)定機(jī)器的工作參數(shù)，如工作溫度，運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)間，工作轉(zhuǎn)速等。
（3）將預(yù)先平衡好的樣品放置于轉(zhuǎn)頭樣品架上，關(guān)閉機(jī)蓋。
（4）按控制面板的運(yùn)轉(zhuǎn)鍵，離心機(jī)開(kāi)始運(yùn)轉(zhuǎn)。在預(yù)先設(shè)定的加速時(shí)間內(nèi)，其運(yùn)速升 至預(yù)先設(shè)定的值。
（5）在預(yù)先設(shè)定的運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)間內(nèi)（不包括減速時(shí)間），離心機(jī)開(kāi)始減速，其轉(zhuǎn)速在預(yù)先設(shè)定的減速時(shí)間內(nèi)降至零。
（6）按控制面板上的停止鍵，數(shù)碼管顯示dedT，數(shù)秒鐘后即顯示閃爍的轉(zhuǎn)速值，這時(shí)機(jī)器已準(zhǔn)備好下一次工作。
3. 注意事項(xiàng)
（1）離心機(jī)應(yīng)始終處于水平位置，外接電源系統(tǒng)的電壓要匹配，并要求有良好的接地線，機(jī)器不使用，要拔掉電源插頭。
（2）開(kāi)機(jī)前應(yīng)檢查轉(zhuǎn)頭安裝是否牢固，機(jī)腔中有無(wú)異物掉入。
（3）樣品應(yīng)預(yù)先平衡，使用離心筒離心時(shí)離心筒與樣品應(yīng)同時(shí)平衡。
（4）揮發(fā)性或腐蝕性液體離心時(shí)，應(yīng)使用帶蓋的離心管，并確保液體不外漏以免腐蝕機(jī)腔或造成事故。
（5）除工作溫度、運(yùn)轉(zhuǎn)速度和運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)間外，不要隨意更改機(jī)器的工作參數(shù)，以免影響機(jī)器性能。轉(zhuǎn)速設(shè)定不得超過(guò)最高轉(zhuǎn)速，以確保機(jī)器安全運(yùn)轉(zhuǎn)。
（6）使用中如出現(xiàn)0.00或其它數(shù)字，機(jī)器不運(yùn)轉(zhuǎn)，應(yīng)關(guān)機(jī)斷電，10秒鐘后重新開(kāi)機(jī)，待所設(shè)轉(zhuǎn)速顯示后，再按運(yùn)轉(zhuǎn)鍵，機(jī)器將照常運(yùn)轉(zhuǎn)。
（7）不得在機(jī)器運(yùn)轉(zhuǎn)過(guò)程中或轉(zhuǎn)子未停穩(wěn)的情況下打開(kāi)蓋門，以免發(fā)生事故。
（8）每次操作完畢應(yīng)做好使用情況記錄，并定期對(duì)機(jī)器各項(xiàng)性能進(jìn)行檢修。
二、電泳儀
電泳技術(shù)是分子生物學(xué)研究不可缺少的重要手段。電泳一般分為自由界面電泳和區(qū)帶電泳大類，自由界面電泳不需支持物，如等速電泳、密度梯度電泳及顯微電泳等，這類電泳目前已很少使用。
區(qū)帶電泳需用各種類型的物質(zhì)作為支持物，常用的支持物有濾紙、醋酸纖維薄膜、非凝膠性支持物、凝膠性支持物及硅膠?DG薄層等，分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中最常用的是瓊脂糖凝膠電泳。
應(yīng)用電泳法可以對(duì)不同物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析，或?qū)⒁欢ɑ旌衔镞M(jìn)行組份分析或單個(gè)組份提取制備。下面以DYY-12型電腦三恒多用電泳儀（北京六一儀器廠）為例介紹其使用方法。
1. 使用方法
（1）按電源開(kāi)關(guān)，顯示屏出現(xiàn)“歡迎使用DYY-12型電腦三恒多用電泳儀…”等字樣后，同時(shí)系統(tǒng)初始化，蜂鳴4聲，設(shè)置常設(shè)置。屏幕轉(zhuǎn)成參數(shù)設(shè)置狀態(tài)，見(jiàn)圖一：
U : 0V U＝ 100V ｜ Mode： STD I: 0mA I ＝ 50mA ｜ P : 0W P＝ 50W ｜ T: 00:00 T＝ 01:00 ｜ |
其中:左側(cè)大寫 U: I: P: T: 為電泳時(shí)實(shí)際值；中間部分顯示程序的常設(shè)值（預(yù)置值）。Mode(模式)：STD(標(biāo)準(zhǔn))；TIME(定時(shí))；VH（伏時(shí)）；STEP（分步）
（2）設(shè)置工作程序。用鍵盤輸入新的工作程序。例如，要求工作電壓U＝1000V，電流I限制在200mA以內(nèi)，功率W限制在100W以內(nèi)，時(shí)間T為3小時(shí)20分，并且到時(shí)間自動(dòng)關(guān)掉輸出。則操作步驟如下：
①按“模式”鍵，將工作模式由標(biāo)準(zhǔn)（STD）轉(zhuǎn)為定時(shí)（TIME）
模式。每按一下模式鍵，其工作方式按下列順序改變： STD?TIME?VH?STEP?STD。
②先設(shè)置電壓U，按“選擇”鍵，先將其反顯，然后輸入數(shù)字鍵即可設(shè)置該參數(shù)的數(shù)值。按數(shù)字1000,則電壓即設(shè)置完成。
③設(shè)置電流I，按“選擇”鍵，先使I反顯，然后輸入數(shù)字200。
④設(shè)置功率P，按“選擇”鍵，先使P反顯，然后輸入數(shù)字100。
⑤設(shè)置時(shí)間T，按“選擇”鍵，先使T反顯，然后輸入數(shù)字320。如果輸入錯(cuò)誤，可以按“清除”鍵，再重新輸入。
⑥確認(rèn)各參數(shù)無(wú)誤后，按“啟動(dòng)”鍵，啟動(dòng)電泳儀輸出程序。在顯示屏狀態(tài)欄中顯示Start! 并蜂鳴4聲，提醒操作者電泳儀將輸出高電壓，注意安全。之后逐漸將輸出電壓加至設(shè)置值。同時(shí)在狀態(tài)欄中顯示“Run”，并有兩個(gè)不斷閃爍的高壓符號(hào)，表示端口已有電壓輸出。在狀態(tài)欄最下方，顯示實(shí)際的工作時(shí)間（精確到秒）。
⑦每次啟動(dòng)輸出時(shí)，儀器自動(dòng)將此時(shí)的設(shè)置數(shù)值存入“MO”號(hào)存儲(chǔ)單元。以后需要調(diào)用時(shí)可以按“讀取”鍵，再按“0”鍵，按“確定”鍵，即可將上次設(shè)置的工作程序取出執(zhí)行。
⑧電泳結(jié)束，儀器顯示：“END”，并連續(xù)蜂鳴提醒。此時(shí)按任一鍵可止鳴
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