緩沖鹽沖洗色譜柱方法
液相色譜和氣相色譜技術
流動相中含有緩沖鹽時,大的原則是:使用前要過渡,使用后要清洗(清洗包括兩個步驟,一個步驟是用來清洗緩沖鹽,另一個步驟是用來清洗強保留物質的),具體請按如下方式保養色譜柱:
1、使用前的過渡:
用乙腈:水=10:90(如果是甲醇體系則用甲醇:水=10:90)以1ml/min流速過渡30min(目的是防止緩沖鹽在進入柱子時析出);
2、一天分析完成后,即使用后的清洗:
1)用乙腈:水=10:90(或甲醇:水=10:90)以1ml/min流速反向沖洗45min(目的是洗去緩沖鹽,防止緩沖鹽在色譜柱內存留引起使用壽命下降);
2)再用乙腈:水=90:10(或甲醇:水=90:10)1ml/min流速反向沖洗45min,(目的是洗去分析過程中積累的強保留物質,防止強保留物質在色譜柱內進一步積累,影響以后的分析,也防止強保留物質的積累導致的柱壓升高),然后色譜柱保存在乙腈:水=90:10(或甲醇:水=90:10)中;
3、如果做完一種化合物,緊接著要做另外一種化合物,由于流動相等條件不同,則請先按步驟2清洗色譜柱,再使用色譜柱;要是接下來做的樣品的流動相里也含有緩沖鹽,也請在步驟2清洗過后再按步驟1的方式來過渡。
1)乙腈:水=10:90或甲醇:水=10:90容易長菌,溫度越高越容易長菌,實驗表明,在28度條件下保存至第5天時發現長菌,不宜多配。
2)Welch公司的色譜柱都能反向沖洗或使用,如果您使用的色譜柱不能反向沖洗或使用,則無需反沖,正向沖洗本方法也適用,只是反沖的效果相對較好。
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