點樣法
點樣法在多聚物的設(shè)計方面與原位合成技術(shù)相似。只是合成工作用傳統(tǒng)的 DNA 、多肽合成儀或 PCR 擴增或體內(nèi)克隆等方法完成。
大量制備好的核酸探針、多肽、蛋白等生物大分子再用特殊的自動化微量點樣裝置將其以較高密度互不干擾地印點于經(jīng)過特殊處理的玻片、尼龍膜、硝酸纖維素膜上,并使其與支持物牢固結(jié)合。支持物需預(yù)先經(jīng)過特殊處理,例如多聚賴氨酸或氨基硅烷等。亦可用其它共價結(jié)合的方法將這些生物大分子牢牢地附著于支持物上。
現(xiàn)在已經(jīng)有比較成型的點樣裝置出售,例如美國 Biodot 公司的“噴印”儀以及 Cartesian Technologies 公司的 Pix-Sys NQ/PA 系列“打印”儀。這些自動化儀器依據(jù)所配備的“打印”或“噴印”針將生物大分子從多孔板吸出直接“打印”或“噴印”于芯片片基上。“打印”時針頭與芯片片基表面發(fā)生接觸而“噴印”時針頭與片基表面保持一定的距離 [1] 。所以,“打印”儀適宜制作較高密度的微陣列(例如 2500 點 /cm2 ),“噴印”法由于“噴印”的斑點較大,所以只能形成較低密度的探針陣列,通常 400 點 /cm2 。
點樣法制作芯片的工藝比較簡單便于掌握、分析設(shè)備易于獲取,適宜用戶按照自己的需要靈活機動地設(shè)計微點陣,用于科研和實踐工作。 目前,除了在生物芯片研制方面享有盛譽的 Affymetrix 公司等個別公司使用原位合成技術(shù)制造芯片外,大多中小型公司普遍采用點樣技術(shù)制作生物芯片。
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